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细胞冻存的步骤
日期：2025-04-30 05:39
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摘要：
细胞冻存的步骤：
1、配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛血清的冻存培养液;
2、取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用 PBS 清洗。
3、去除 PBS，加入适量胰蛋白酶 (覆盖培养皿表面) 把单层生长的细胞消化下来;
4、离心 1000rpm，5min;
5、去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的zui 终密度为 5×106/ml~1×107/ml;
6、将细胞分装入冻存管中，每管 1~1.5 ml;
7、在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作...
细胞冻存的步骤：
1、配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛血清的冻存培养液;
2、取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用 PBS 清洗。
3、去除 PBS，加入适量胰蛋白酶 (覆盖培养皿表面) 把单层生长的细胞消化下来;
4、离心 1000rpm，5min;
5、去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的zui 终密度为 5×106/ml~1×107/ml;
6、将细胞分装入冻存管中，每管 1~1.5 ml;
7、在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者;
8、冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱 2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。