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实时荧光定量PCR（qPCR）三个主要阶段介绍
日期：2025-06-15 18:13
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摘要：
实时荧光定量PCR（qPCR）的基本原理包括三个主要阶段，这些阶段反映了PCR扩增过程中的荧光信号变化：
1、基线期：在PCR反应开始时，荧光信号几乎不变，主要是因为背景荧光的存在掩盖了PCR产物的荧光信号。这一阶段的荧光信号变化不大，接近一条直线，用于设置基线。
2、指数期：随着PCR循环的进行，目标DNA序列被指数级扩增，荧光信号随之增加。这一阶段荧光信号呈指数增长，PCR产物量与起始模板量呈线性关系，是进行定量分析的理想阶段。
3、平台期：当PCR反应接近完成时，由于DNA聚合酶活性下降、底物耗尽或抑制...
实时荧光定量PCR（qPCR）的基本原理包括三个主要阶段，这些阶段反映了PCR扩增过程中的荧光信号变化：
1、基线期：在PCR反应开始时，荧光信号几乎不变，主要是因为背景荧光的存在掩盖了PCR产物的荧光信号。这一阶段的荧光信号变化不大，接近一条直线，用于设置基线。
2、指数期：随着PCR循环的进行，目标DNA序列被指数级扩增，荧光信号随之增加。这一阶段荧光信号呈指数增长，PCR产物量与起始模板量呈线性关系，是进行定量分析的理想阶段。
3、平台期：当PCR反应接近完成时，由于DNA聚合酶活性下降、底物耗尽或抑制物积累，扩增效率降低，荧光信号的增加趋于平缓，zui终停止。这一阶段荧光信号不再显著增加，PCR产物达到饱和状态。
在指数期，通过设定荧光阈值（阈值循环数，Ct值），可以准确地对样品中的初始模板量进行定量分析。Ct值越小，说明初始模板量越大。利用标准曲线，可以将Ct值转换为模板的起始拷贝数，实现对目标序列的定量检测。