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荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称 |
磷酸化β-肌动蛋白抗体 |
英文名称 |
Anti-phospho-betaActin(Tyr53) |
货号 |
BH-K016223 |
英文名称 Anti-phospho-betaActin(Tyr53)
中文名称 磷酸化β-肌动蛋白抗体
别 名 beta Actin (phospho Y53); p-beta Actin (phospho Y53); A26C1A; A26C1B; ACTB; ACTB_HUMAN; Actin cytoplasmic 1; Actx; beta cytoskeletal actin; Beta-actin; E430023M04Rik; MGC128179; PS1TP5 binding protein 1; PS1TP5BP1.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 细胞生物 信号转导 细胞类型标志物 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 42kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human beta Actin around the phosphorylation site of Tyr53
产品应用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的生活习性:
(1)结合特异性抗原:抗体与其他球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等疫作用。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动疫。疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生疫应答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
神经束蛋白(NFASC)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforNeurofascin(NFASC) 规格:48T/96T 进口、国产
Taperin蛋白(TPRN)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforTaperin(TPRN) 规格:48T/96T 进口、国产
间生蛋白1(MSGN1)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforMesogenin1(MSGN1) 规格:48T/96T 进口、国产
α2-巨球蛋白(α2M)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforAlpha-2-Macroglobulin(a2M) 规格:48T/96T 进口、国产
α白蛋白(AFM)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforAfamin(AFM) 规格:48T/96T 进口、国产
组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforTissueInhibitorsOfMetalloproteinase1(TIMP1) 规格:48T/96T 进口、国产
二酰甘油-O-酰基转移酶同源物1(DGAT1)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforDiacylglycerol-O-AcyltransferaseHomolog1(DGAT1) 规格:48T/96T 进口、国产
突触融合蛋白18(STX18)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforSyntaxin18(STX18) 规格:48T/96T 进口、国产
蛋白激酶Bγ(PKBγ)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforProteinKinaseBGamma(PKBg) 规格:48T/96T 进口、国产
C-型钠尿肽(CNP)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforC-TypeNatriureticPeptide(CNP) 规格:48T/96T 进口、国产
促肾上腺皮质释放因子抗体
5号染色体开放阅读框52抗体
1号染色体开放阅读框145抗体
肿瘤坏死因子受体超家族成员9抗体
杀肽/天蚕抗肽单克隆抗体
CD329抗体
CD151抗体
Wnt通路抑制因子2抗体
三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体
防御素α4抗体
MAP激酶激活死亡域蛋白2C抗体
磷酸化β-肌动蛋白抗体钽试剂Butyl benzoate,≥98%100G通用试剂
左西孟旦Benzyl benzoate,≥99%100G通用试剂
锌试剂2Ethylhexyl acrylate,98%100ML通用试剂
铅试剂Ethyl cinnamate,≥98%100G通用试剂
镁试剂IEthyl salicylate,≥99%100G通用试剂
镁试剂IIButyl salicylate,≥99%100G通用试剂
高铁试剂Phenyl salicylate,≥99%100G通用试剂
试剂(3甲基2并噻唑啉腙盐盐)Ethyl stearate,≥99%5G通用试剂
米格列Butyl stearate,99%25ML通用试剂
米格列(标准品)Methyl laurate,≥98%100G通用试剂
1酞Ethyl methyl sulfonate,≥98.0%5G通用试剂
盐达泊西汀(混旋)Ethyl methacrylate,99%100ML通用试剂
盐达泊西汀(右旋)Ethyl acetoacetate,≥99%100G通用试剂
固黑K盐Methyl acetoacetate,≥99%500G通用试剂
氨基黑10BNωNitroLarginine1G通用试剂