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荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称 |
磷酸化自噬相关蛋白4D抗体 |
英文名称 |
Anti-phospho-ATG4D(Ser467) |
货号 |
BH-K016211 |
英文名称 Anti-phospho-ATG4D(Ser467)
中文名称 磷酸化自噬相关蛋白4D抗体
别 名 APG4 D; APG4D; ATG4 autophagy related 4 homolog D; Atg4dl; AUT like 4 cysteine endopeptidase; AUTL4; Autophagin 4; Autophagy related cysteine endopeptidase 4; Autophagy related protein 4 homolog D; Cysteine protease ATG4D.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 信号转导 细胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG4D around the phosphorylation site of Ser467 [RP(p-S)SE]
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的生活习性:
(1)结合特异性抗原:抗体与其他球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等疫作用。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动疫。疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生疫应答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
基质金属蛋白酶25(MMP25)elisa检测试剂盒英文名称:MMP25 ELISA Kit,英文缩写:MMP25,产品别名:基质金属蛋白酶25(MMP25)ELISA检测试剂盒,基质金属蛋白酶25(MMP25)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
核黄素激酶(RFK)elisa检测试剂盒英文名称:RFK ELISA Kit,英文缩写:RFK,产品别名:核黄素激酶(RFK)ELISA检测试剂盒,核黄素激酶(RFK)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
黄体**素(LH)elisa检测试剂盒英文名称:LH ELISA Kit,英文缩写:LH,产品别名:黄体**素(LH)ELISA检测试剂盒,黄体**素(LH)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
骨桥素(OPN)elisa检测试剂盒英文名称:OPN ELISA Kit,英文缩写:OPN,产品别名:骨桥素(OPN)ELISA检测试剂盒,骨桥素(OPN)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
高敏甲状腺素(u-T4)elisa检测试剂盒英文名称:u-T4 ELISA Kit,英文缩写:u-T4,产品别名:高敏甲状腺素(u-T4)ELISA检测试剂盒,高敏甲状腺素(u-T4)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
甘露糖(Mannose)elisa检测试剂盒英文名称:Mannose ELISA Kit,英文缩写:Mannose,产品别名:甘露糖(Mannose)ELISA检测试剂盒,甘露糖(Mannose)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
肺炎衣原体抗原(Cpn)elisa检测试剂盒英文名称:Cpn ELISA Kit,英文缩写:Cpn,产品别名:肺炎衣原体抗原(Cpn)ELISA检测试剂盒,肺炎衣原体抗原(Cpn)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
多效生长因子(PTN)elisa检测试剂盒英文名称:PTN ELISA Kit,英文缩写:PTN,产品别名:多效生长因子(PTN)ELISA检测试剂盒,多效生长因子(PTN)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
第八因子相关抗原(FⅧAg)elisa检测试剂盒英文名称:FⅧAg ELISA Kit,英文缩写:FⅧAg,产品别名:第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA检测试剂盒,第八因子相关抗原(FⅧAg)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
蛋白S(ProteinS)elisa检测试剂盒英文名称:ProteinS ELISA Kit,英文缩写:ProteinS,产品别名:蛋白S(ProteinS)ELISA检测试剂盒,蛋白S(ProteinS)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
催产素受体(OXTR)elisa检测试剂盒英文名称:OXTR ELISA Kit,英文缩写:OXTR,产品别名:催产素受体(OXTR)ELISA检测试剂盒,催产素受体(OXTR)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
神经***转化酶2抗体
GSK3B相互作用蛋白抗体
轴突蛋白1(Neurexin 1α)抗体
磷酸化分化相关基因NDRG1抗体
富含亮氨酸重复结构域蛋白6抗体
神经生长因子4/5抗体
醌氧化还原酶抗体
嗅球蛋白3抗体
卵巢癌相关基因2蛋白抗体
蛋白激酶C zeta 抗体
磷酸化蛋白激酶C nu型抗体
磷酸化自噬相关蛋白4D抗体替卡西林(标准品)3Methylthiophene25ML多肽试剂
RGD肽2Methylthiophene ,≥98%25G多肽试剂
肝素2Chlorothiophene,>96.0%25G多肽试剂
促胰液素;胰泌素2,5Dibromothiophene ,≥96.0%10G多肽试剂
麝香草Dibenzothiophene, ≥99.0%1G多肽试剂
普拉洛芬2Hexylthiophene ,≥97%1G多肽试剂
普拉洛芬(标准品)4,6Dimethyldibenzothiophene, ≥99.0%250MG多肽试剂
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白组分五2Acetylthiophene,≥99.0%25G多肽试剂
啶;啶2Acetyl5bromothiophene,≥99.0%5G多肽试剂
糖原,α1,6 葡聚糖,糖元3,4Ethylenedioxythiophene ,≥97.0%5G多肽