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荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称 |
磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体 |
英文名称 |
Anti-Phospho-cdc25C(Ser216) |
货号 |
BH-K016165 |
英文名称 Anti-Phospho-cdc25C(Ser216)
中文名称 磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体
别 名 cdc25C(Phospho-Ser216); CDC 25; Cdc 25C; CDC25; CDC25C; Cell division cycle 25 homolog C; Cell Division Cycle 25C; Cell Division Cycle 25C; Cell division cycle 25C protein; Dual specificity phosphatase Cdc25C; M phase inducer phosphatase 3; M-phase inducer phosphatase 3; Mitosis inducer CDC25; MPIP3; MPIP3_HUMAN; Phosphotyrosine phosphatase.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human cdc25C around the phosphorylation site of Ser216
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的生活习性:
(1)结合特异性抗原:抗体与其他球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等疫作用。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动疫。疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生疫应答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
套膜蛋白(iNV)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforInvolucrin(iNV) 规格:48T/96T 进口、国产
巨噬炎性蛋白5(MIP5)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforMacrophageInflammatoryProtein5(MIP5) 规格:48T/96T 进口、国产
赖氨酸tRNA合成酶(KARS)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforLysyltRNASynthetase(KARS) 规格:48T/96T 进口、国产
唾液酸转移酶4A(SIAT4A)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforSialyltransferase4A(SIAT4A) 规格:48T/96T 进口、国产
雌酮(E1)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforEstrone(E1) 规格:48T/96T 进口、国产
普列克底物蛋白(PLEK)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforPleckstrin(PLEK) 规格:48T/96T 进口、国产
表皮生长因子受体(EGFR)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforEpidermalGrowthFactorReceptor(EGFR) 规格:48T/96T 进口、国产
线粒体乙醛脱氢酶(ALDM)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforAldehydeDehydrogenase,Mitochondrial(ALDM) 规格:48T/96T 进口、国产
甘露糖受体C2(MRC2)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforMannoseReceptorCType2(MRC2) 规格:48T/96T 进口、国产
突触融合蛋白4(STX4)检测试剂盒(酶联吸附试验法) ELISAKitforSyntaxin4(STX4) 规格:48T/96T 进口、国产
驱动蛋白2抗体
磷酸化钾通道蛋白DRK1抗体
激肽释放酶12抗体
肺腺瘤易感蛋白2抗体
白血病相关蛋白5抗体
LRRC41蛋白抗体
白血病抑制因子抗体
低分子质量蛋白2抗体
MD-2蛋白抗体
26S蛋白酶调节亚型7抗体
磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体
磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体BrMmc (=4甲基7甲氧基香豆素)(>98.0%(T))4Bromobenzoyl chloride10G通用试剂
3甲基7甲氧基1,4并恶嗪2(>98.0%(T))2,3Dichlorobenzoyl chloride, ≥98.0 %25G通用试剂
4甲基6,7二甲氧基香豆素(>98.0%(HPLC))2,6Dichlorobenzoyl chloride,≥98.0 %10G通用试剂
DBDCOHz [=4(N,N二甲基氨基磺酰)7(N肼基羰甲基N甲基)氨基2,1,3并恶二唑](>98.0%(HPLC))
3,4Dichlorobenzoyl chloride ≥97.0%5G通用试剂
NBDCOHz [=4(N肼羰甲基N甲氨基)7基2,1,3并恶二唑](>95.0%(HPLC))Crotonoyl chloride,≥90.0 %25G通用试剂
DBDED [=4(N,N二甲氨基磺酰)7(2氨基乙基氨基)2,1,3并恶二唑]Octanoyl chloride,≥99.0%100ML通用试剂
AABDSH (=4乙酰氨基7巯基2,1,3并恶二唑](>94.0%(HPLC))1Naphthoyl chloride10G通用试剂
9(甲基)丫啶(>98.0%(HPLC)(T))4(Chloromethyl)benzonitrile,≥98.0 %10G通用试剂
DBDCOCl [=4(N,N二甲基氨磺酰)7(N氯甲酰甲基N甲氨基)2,1,3并恶二唑](>98.0%(T))3,5Dimethylbenzoyl chloride,≥97.0 %5G通用试剂
NBDCOCl [=4(N氯甲酰甲基N甲氨基)7基2,1,3并恶二唑](>92.0%(T))Cyclopropanesulfonyl Chloride, ≥97.0 %1G通用试剂
邻二甲醛(>99.0%(GC))Myristoyl chloride, ≥98.0%25G通用试剂
丹磺酰肼(>95.0%(HPLC)(T))Decanoyl Chloride25ML通用试剂
DBDH [=4(N,N二甲氨基磺酰)7肼基2,1,3并恶二唑(>98.0%(HPLC))3Fluorobenzoyl Chloride5G通用试剂
NBDH (=4肼基7基2,1,3并恶二唑肼)(>98.0%(HPLC))3Bromobenzenesulfonyl Chloride,≥98.0%1G通用试剂
1,3环己二(>98.0%(GC)(T))Diphosphoryl chloride,≥97.0%25G通用试剂