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别 名 p-Afadin(Ser1721); Afadin (phospho S1721); Afadin (phospho Ser1721); MLLT4; Protein AF6; AF6; Afadin; AFAD_HUMAN; ALL1-fused gene from chromosome 6 protein; Protein AF-6.
英文名称 Anti-phospho-Afadin(Ser1721)
中文名称 磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 细胞生物 **学 神经生物学 信号转导 细胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 201kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Afadin around the phosphorylation site of Ser1721 [VL(p-S)PD]
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
本公司产品仅用于科研实验。
抗体的荧光标记法:
(一)基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
(二)仪器和试剂
1.待偶联抗体;
2.碳酸氢钠缓冲液;
3.叠氮钠;
4.庵氰酸荧光素;
5.电磁搅拌器。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)elisa检测试剂盒英文名称:cTnⅠ ELISA Kit,英文缩写:cTnⅠ,产品别名:肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA检测试剂盒,肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)elisa检测试剂盒英文名称:AGMAT ELISA Kit,英文缩写:AGMAT,产品别名:胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)ELISA检测试剂盒,胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
核因子κB受体活化剂配体(RANKL)elisa检测试剂盒英文名称:RANKL ELISA Kit,英文缩写:RANKL,产品别名:核因子κB受体活化剂配体(RANKL)ELISA检测试剂盒,核因子κB受体活化剂配体(RANKL)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
钩端螺旋体IgG(Leptospira)elisa检测试剂盒英文名称:Leptospira ELISA Kit,英文缩写:Leptospira,产品别名:钩端螺旋体IgG(Leptospira)ELISA检测试剂盒,钩端螺旋体IgG(Leptospira)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)elisa检测试剂盒英文名称:HBEGF ELISA Kit,英文缩写:HBEGF,产品别名:肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)ELISA检测试剂盒,肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
封闭抗体(BA)elisa检测试剂盒英文名称:BA ELISA Kit,英文缩写:BA,产品别名:封闭抗体(BA)ELISA检测试剂盒,封闭抗体(BA)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
二氢嘧啶脱氢酶[NADP+](DPYD)elisa检测试剂盒英文名称:DPYD ELISA Kit,英文缩写:DPYD,产品别名:二氢嘧啶脱氢酶[NADP+](DPYD)ELISA检测试剂盒,二氢嘧啶脱氢酶[NADP+](DPYD)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
凋亡相关因子(Fas)elisa检测试剂盒英文名称:Fas ELISA Kit,英文缩写:Fas,产品别名:凋亡相关因子(Fas)ELISA检测试剂盒,凋亡相关因子(Fas)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
蛋白聚糖4(PRG4)elisa检测试剂盒英文名称:PRG4 ELISA Kit,英文缩写:PRG4,产品别名:蛋白聚糖4(PRG4)ELISA检测试剂盒,蛋白聚糖4(PRG4)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
大内皮素(Big ET-1)elisa检测试剂盒英文名称:Big ET-1 ELISA Kit,英文缩写:Big ET-1,产品别名:大内皮素(Big ET-1)ELISA检测试剂盒,大内皮素(Big ET-1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
串珠素(HSPG2)elisa检测试剂盒英文名称:HSPG2 ELISA Kit,英文缩写:HSPG2,产品别名:串珠素(HSPG2)ELISA检测试剂盒,串珠素(HSPG2)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
磷酸化胰岛素受体底物-1抗体
IQCD蛋白抗体
肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体
INCA1蛋白抗体
整合素α4抗体
胰岛素样生长因子结合蛋白5抗体
整合素α6抗体
白介素-1受体拮抗剂抗体
白介素-18受体β链抗体
纤毛内转运同源蛋白140抗体
凋亡**受体抗体
磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体ε聚赖氨ptertButylphenol,99%100G通用试剂
普罗雌Eugenol,99%25G通用试剂
波生坦(水合物)2tertButyl4methylphenol,99%100G通用试剂
波生坦水合(标准品)2,4,6Tritertbutylphenol,98%25G通用试剂
福沙坦二甲葡(MK0517) 2,6Ditertbutylphenol,99%100ML通用试剂
普拉格雷2,4Ditertbutylphenol,99%100G通用试剂
盐可乐定3,4Dimethylphenol,98%25G通用试剂
盐可乐定(标准品)2,6Dimethylphenol,99%100G通用试剂
2甲氧基雌二(进分)2,5Dimethylphenol,≥99%25G通用试剂
2甲氧基雌二2,4Dimethylphenol,98%100ML通用试剂
2甲氧雌二(标准品)2,3Dimethylphenol,99%100G通用试剂
盐乙双胍/降糖灵/盐乙福明2,6Dichlorophenol,99%25G通用试剂
盐乙双胍/降糖灵/盐乙福明(标准品)3Chlorophenol,98%25G通用试剂
头孢2,3,5Trimethylphenol,99%25G通用试剂
头孢(标准品)2Chloro4nitrophenol,97%5G通用试剂
抗体的种类:
抗体是在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。
(1) IgG:是血清中浓度大的一类球蛋白,约占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后,其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体,分子量16万~18万,可以通过兔的胎盘,但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中,参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。
(2) IgM:由5个球蛋白单位组成的五聚体,在血清中的含量仅次于IgG,分子量90万,是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后,IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG,主要分布在血管内,可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体,免作用很强,是IgG的100倍,但由于含量仅为IgG的1/10,且持续时间短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中,参与凝集反应和补体结合反应。
(3) IgA:有单体和双体两种形式。单体存在于血清中,分子量约为17万,亦称为血清型IgA,有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中,如唾液、泪液、初乳、气管分泌液,以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA,由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生,分子量40万,含量较单体高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一种特殊的糖蛋白,为单位体结构,分子量19万,由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成,在血清中含量甚微,是一种致敏抗体,容易吸附在**表面,当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。