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荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称 |
转录因子Gli2抗体 |
英文名称 |
Anti-Gli2 |
货号 |
BH-K013941 |
英文名称 转录因子Gli2抗体
中文名称 转录因子Gli2抗体
别 名 Gli 2; Gli-2; GLI family zinc finger 2; GLI kruppel family member 2; GLI Kruppel family member GLI2; GLI2; GLI2_HUMAN; Oncogene GLI2; Tax helper protein 2; Tax helper protein; Tax responsive element 2 holding protein; Tax responsive element 25 bp sequence binding protein; THP 2; THP; THP2; Zinc finger protein GLI2.
浓 度 1mg/1ml
规 格 1mg/1ml
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 神经生物学 信号转导 干细胞 转录调节因子 锌指蛋白 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 168kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Gli2 (501-600aa)
亚 型 IgG
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的生活习性:
(1)结合特异性抗原:抗体与其他球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等疫作用。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动疫。疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生疫应答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
植物杆 Lactobacillus Plantarum大鼠腺上皮细胞完全培养基
AtT-20(小鼠垂体瘤细胞)H4-II-E-C3(大鼠肝细胞 )
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri台湾根霉 Rhizopus formosensis
人成骨肉瘤细胞双环林地菇 Agaricus placomyces
鲜绿青霉 Penicillium viridicatum大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
L6(大鼠成肌细胞)U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)
苜蓿中华根瘤 Sinorhizobium meliloti球孢白僵 Beauveria bassiana
MA, 小鼠星形胶质细胞KATO III(人胃细胞)
人视网膜色素上皮细胞完全培养基THP-1人单核白血病细胞
人肾动脉平滑肌细胞完全培养基土曲霉 Aspergillus terreus
苜蓿中华根瘤 Sinorhizobium meliloti苜蓿中华根瘤
293A,人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别)大鼠小鼠杂合神经胶质瘤细胞
胰酶细胞消化液MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞
转录因子Gli2抗体2,6-二甲基酚 英文名称:2, 6- two methyl phenol 保存:-20℃ 规格:50mg
6-甲氧基-2-萘乙酮 英文名称:6- methoxy -2- acetonaphthone 保存:-20℃ 规格:50mg
硝基呋喃丙烯酸 英文名称:Nitro furan acrylic acid 保存:-20℃ 规格:100mg
甲磺酸双氢麦角毒碱 英文名称:Dihydroergotoxine methanesulfonate 保存:-20℃ 规格:500mg
安石榴苷、安石榴甙 英文名称:Ashmore eclogite glycosides, punicalagin 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 10mg/支
芥碱硫氰酸盐 英文名称:Sinapine thiocyanate 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支
黄腐酚 英文名称:Xanthohumol 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支
瓜子金皂苷己 英文名称:Polygalasaponin oneself 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支
泽泻醇A-24-醋酸酯;泽泻醇A醋酸酯 英文名称:Alisol A-24- acetate Alisol A acetate; 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 10mg/支
新补骨脂异黄酮 英文名称:Neobavaisoflavone 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支
酮麝香 英文名称:Musk ketone 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支
白花前胡丁素 英文名称:White Qian Hu Dingsu 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 10mg/支