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荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质**,价格实惠,多种规格供应,售后完善。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称 |
磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体 |
英文名称 |
Anti-phospho-GIT1(Ser375) |
货号 |
BH-K013823 |
英文名称 磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体
中文名称 磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体
别 名 GIT1 (phospho S375); p-GIT1 (phospho-S375); ARF GAP GIT1; ARF GTPase activating protein GIT1; CAT 1; Cat1; Cool associated and tyrosine phosphorylated protein 1; G protein coupled receptor kinase interactor 1; GRK interacting protein 1.
浓 度 1mg/1ml
规 格 1mg/1ml
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Chicken
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 **学 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
蛋白分子量 predicted molecular weight: 84kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human GIT1 around the phosphorylation site of Ser375
亚 型 IgG
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物实验。
4、试取血样进行测试,查看效果。
5、如果成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的生活习性:
(1)结合特异性抗原:抗体与其他球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等疫作用。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动疫。疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生疫应答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
小鼠神经干细胞(EGFP标记)
噬尼古丁节杆 Arthrobacter nicotinovorans
局限青霉 Penicillium resteictum
小鼠皮下脂肪细胞完全培养基酸球霍氏亚种 Lactococcus lactis subsp. hordniae
多枝镰孢束梗链格孢 Alternaria bokurai
人脐带单核细胞完全培养基人膀胱移行细胞
爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基
QBC-939, 人胆管细胞
木生条孢牛肝 Boletellus emodensis
苜蓿中华根瘤 Sinorhizobium meliloti
苜蓿中华根瘤 Sinorhizobium meliloti黑曲霉 Aspergillus niger
植物杆 Lactobacillus plantarum苏云金芽孢杆 Bacillus thuringiensis
根瘤HA(人羊膜细胞)
磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体二十二碳六稀酸乙酯 英文名称:Twenty-two carbon six dilute acid ethyl ester 保存:-20℃ 规格:约1ml/支,20.4mg /支
腺苷钴胺 英文名称:Cobamamide 保存:-20℃ 规格:100mg/支
纤维蛋白原(牛血) 英文名称:Fibrinogen (Niu Xue) 保存:-20℃ 规格:88mg可凝蛋白/支
2-萘酚 英文名称:2- naphthol 保存:-20℃ 规格:50mg/支
头孢硫脒 英文名称:Cefathiamidine 保存:-20℃ 规格:100mg
左氧氟沙星 英文名称:Levofloxacin 保存:-20℃ 规格:100mg
β-多西环素 英文名称:Beta doxycycline 保存:-20℃ 规格:50mg
苯 英文名称:Benzene 保存:-20℃ 规格:1ml
滇鸡血藤 英文名称:The Yunnan Caulis Spatholobi 保存:-20℃ 规格:2g
绒毛龙芽草 英文名称:Villus Agrimony 保存:-20℃ 规格:2g
三棱 英文名称:Rhizoma sparganii 保存:-20℃ 规格:1g
金果榄 英文名称:Jin Guolan 保存:-20℃ 规格:0.1g