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  • 产品名称：荧光定量PCR试剂盒

  • 产品型号：BH-205599
  • 产品厂商：派瑞曼
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简单介绍：
荧光定量PCR试剂盒可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
详情介绍：

相对定量分析方法  ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
 1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
   ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
   ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
 2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
        ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
 3、计算表达水平比率：
                   2 –ΔΔCT=表达量的比值

参数规格：

产品名称：荧光定量PCR试剂盒
货号：BH-205599

使用方法:

一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

具有下列特点：
1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级，可以达到几百拷贝/反应。
3.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
4.一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的**离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、**双蒸水。

"10mL 亚氨二乙酸介质 IDA（Iminodiacetic Acid）Resin 常温保存
1套 GST 固定试剂盒 GST  Immobilization Kit -20℃保存
1mg 谷胱甘肽S 转移酶 GST(Glutathione S-Transferase) -20℃保存
10次 非变性法蛋白沉淀试剂盒 Non-Denaturing Protein Precipitation Kit  常温保存
1.5mL 核酸剂 Nucleic Acid Erasol -20℃保存
50次 微量蛋白沉淀试剂盒 Mini Protein Precipitation Kit 常温保存
15次 血清白蛋白剂 Serum Albumin Erasol 常温保存
20次 蛋白剂  
12块 SDS-PAGE预制胶 Instant SDS-PAGE Gel 4℃保存
30次 一站式SDS-PAGE电泳套装 One-Stop SDS-PAGE Pack 丙烯酰胺溶液4℃保存，上样缓冲液需要-20℃保存，其余常温保存
500mL SDS-PAGE浓缩胶配胶液 SDS-PAGE Stacking Gel Buffer 4℃保存
500mL SDS-PAGE分离胶配胶液 SDS-PAGE Resolving Gel Buffer 4℃保存
1mL SDS-PAGE上样液，5× SDS-PAGE Loading Buffer，5× -20℃保存
人 NUDC 基因全长ORF克隆
人 ALX1 基因全长ORF克隆
人 BRCC3 基因全长ORF克隆
荧光定量PCR试剂盒人 AKTIP 基因全长ORF克隆
人 DGUOK 基因全长ORF克隆
人 ATG5 基因全长ORF克隆
人 HSD17B14 基因全长ORF克隆
人 LRRC18 基因全长ORF克隆
人 EAF2 基因全长ORF克隆
人 PEX11B 基因全长ORF克隆
人 DCUN1D1 基因全长ORF克隆

注意事项：
1. 建议使用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
2. 试剂Buffer AL若低温保存，易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
3. 电泳检测时，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则，电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内，以便扩增效率佳。
?5. 为了您的**和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作

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