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它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 |
规格 |
货号 |
50T脑膜炎奈瑟菌血清群XPCR检测试剂盒 |
50T |
BH-P63352 |
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒 ATA ELISA Kit 间隙连接蛋白43抗体英文名称:Connexin 43 0.1ml
人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒 ANGA ELISA Kit 紧密连接蛋白25抗体英文名称:CLDN25 0.1ml
人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA试剂盒 ANA ELISA Kit 中心体蛋白78抗体英文名称:CEP78 0.1ml
人抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒 pANCA ELISA Kit 6号染色体开放阅读框146抗体英文名称:C6orf146 0.2ml
人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA试剂盒 cANCA ELISA Kit 6号染色体开放阅读框154抗体英文名称:C6ORF154 0.1ml
人抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 ACA ELISA Kit 9号染色体开放阅读框16抗体英文名称:C9orf16 0.2ml
人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA试剂盒 ACA/CENP ELISA Kit 9号染色体开放阅读框78抗体英文名称:C9orf78 0.2ml
人抗着丝点抗体(ACA)ELISA试剂盒 ACA ELISA Kit 9号染色体开放阅读框79抗体英文名称:C9orf79 0.2ml
人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒 PCNA ELISA Kit 9号染色体开放阅读框84抗体英文名称:C9orf84 0.2ml
人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)ELISA试剂盒 Apo A1 ELISA Kit 9号染色体开放阅读框85抗体英文名称:C9orf85 0.2ml
人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白(TAP)ELISA试剂盒 TAP ELISA Kit 9号染色体开放阅读框91抗体英文名称:C9ORF91 0.2ml
人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)ELISA试剂盒 SCL70/topoⅠ ELISA Kit 9号染色体开放阅读框93抗体英文名称:C9orf93 0.2ml
人抗异质型核糖核蛋白抗体/抗RA33抗体(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)ELISA试剂盒 anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab ELISA Kit 9号染色体开放阅读框96抗体英文名称:C9orf96 0.2ml
人抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒 AT ELISA Kit 细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体英文名称:CDC5L 0.1ml
人抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA试剂盒 AIRA ELISA Kit 9号染色体开放阅读框98抗体英文名称:C9orf98 0.2ml
50T脑膜炎奈瑟菌血清群XPCR检测试剂盒乙酰紫草素 Acetylshikonin 24502-78-1 20mg
6''-O-丙二酰基染料木苷 6''-O-Malonylgenistin 51011-05-3 5mg
(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷 Episyringaresinol 4'-O-β-D-glncopyranoside 137038-13-2 10mg
白麻苷 Quercetin 3-O-sophoroside 18609-17-1 20mg
莪术呋喃二烯酮 Furanodienon 24268-41-5 10mg
1,7-双苯-5-羟基-6-庚烯-3-酮 5-Hydroxy-1,7-diphenyl-6-hepten-3-one 87095-74-7 10mg
堪非醇-3-O-桑布双糖苷 Leucoside 27661-51-4 10mg
去氧紫草素 Deoxyshikonin 43043-74-9 10mg
β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁 β-Acetoxyisovalerylalkannin 69091-17-4 10mg
6''-丙二酸沙苑子苷单酯 Complanatuside 6′′-malonate 10mg
当药黄素 Swertisin 1859726 10mg
常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷 Hederagenin 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 53931-25-2 10mg
旱莲苷D Ecliptasaponin D 206756-04-9 10mg