主营产品：
生化试剂，标准品,对照品，PCR试剂盒， 核酸检测试剂盒，荧光定量检测试剂盒，生化试剂盒 ，比色法试剂盒，酶活性检测试剂盒，ELISA试剂盒，酶联免yi检测试剂盒，试剂盒，ELISA试剂盒，抗体，重组蛋白，分光光度法检测试剂盒，细胞株，原代细胞，细胞培养基，标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
咨询电话：18117197628
影响PCR特异性的因素分析
日期：2025-04-30 16:24
浏览次数：652
摘要：
有许多因素可以影响PCR的特异性，在此我们作一归纳，供大家参考：
1、退火步骤的严格性：提高退火温度可以减少不匹配的杂交，从而提高特异性。
2、减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。
3、引物二聚体是常见的副产品，降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发，尤其是引物的二聚化。
4、改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性，这可能是提高反应严格性或者对Taq酶的直接作用。
5、模板中如果存在次级结构，例如待扩增的片段易自行形成发夹结构时，可在PCR混合物中的4×dNTPs中加...
有许多因素可以影响PCR的特异性，在此我们作一归纳，供大家参考：
1、退火步骤的严格性：提高退火温度可以减少不匹配的杂交，从而提高特异性。
2、减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。
3、引物二聚体是常见的副产品，降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发，尤其是引物的二聚化。
4、改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性，这可能是提高反应严格性或者对Taq酶的直接作用。
5、模板中如果存在次级结构，例如待扩增的片段易自行形成发夹结构时，可在PCR混合物中的4×dNTPs中加入7-脱氮-2’-脱氧鸟苷-5’-三磷酸（7-deaza-2’-deoxyguanosine-5’-trihosphate）(de7GTP)。用de7GTP与dGTP比例为3：1的混合物（150μmol/l de7GTP +50μmol/L dGTP）代替200μmol/l dGTP，则可阻非特异性产物的**。